【您在采購(gòu)過(guò)程中有任何問(wèn)題,請(qǐng)聯(lián)系18510511586微信同號(hào)】 羥苯基熒光素(HPF)/359010-69-8產(chǎn)品描述 氨基苯基熒光素(APF)和羥苯基熒光素(HPF)是由T. Nagano開(kāi)發(fā)的兩種活性氧(Reactive oxygen species, ROS)指示劑,比H2DCFDA(DCFH-DA, DCFH)具更優(yōu)秀的特異性和穩(wěn)定性。APF和HPF顯示有限的非選擇性反應(yīng),和相對(duì)較高的光誘導(dǎo)氧化抗性。APF和HPF具細(xì)胞膜滲透性,本身無(wú)熒光,直到與羥基自由基或過(guò)氧亞硝基陰離子反應(yīng),還能與次氯酸陰離子反應(yīng),產(chǎn)生強(qiáng)綠色熒光(Ex/Em,~490/515nm),可用熒光顯微鏡、高通量成像儀、熒光酶標(biāo)板或流式細(xì)胞儀檢測(cè)。 本品以粉末形式提供,可直接溶于DMF配制成5mM儲(chǔ)存液,常用工作濃度范圍1-10μM,需根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)體系或參考文獻(xiàn)進(jìn)行優(yōu)化。 產(chǎn)品特性 1)CAS NO.:359010-69-8 2)同義名:3′-p-(hydroxyphenyl) fluorescein (HPF)羥苯基熒光素 3)分子式:C26H16O6 4)分子量:424.4 5)純度:≥95% 6)Ex/Em:492/515nm 7)溶解性:溶于DMSO(10mM)、DMF(5mM) 8)化學(xué)結(jié)構(gòu): 保存與運(yùn)輸方法 保存:-20℃避光干燥保存,至少一年有效。 運(yùn)輸:冰袋運(yùn)輸。
使用方法 一、儲(chǔ)存液制備 將低溫保存的1mg粉末置于室溫回溫至少20min,之后加入471μl 無(wú)水DMF配置成5mM儲(chǔ)存液。充分溶解和混勻后,按照單次用量分裝,-20oC避光干燥保存,避免反復(fù)凍融。 【注】:HPF能溶于DMSO(10mM),但有數(shù)據(jù)顯示DMSO是羥基自由基的淬滅劑,會(huì)干擾檢測(cè)和降低靈敏性。因此,建議用DMF作為溶劑。 二、溶液體系檢測(cè) 正式實(shí)驗(yàn)前,取一管HPF儲(chǔ)存液置于室溫回溫,使其充分融解。之后用合適的緩沖液(比如HHBS緩沖液,PBS緩沖液)稀釋到所需的工作濃度。建議起始濃度為1-10μM,需根據(jù)自身的實(shí)驗(yàn)體系或參考文獻(xiàn)進(jìn)行優(yōu)化。 三、細(xì)胞體系檢測(cè) 以下實(shí)驗(yàn)步驟僅做參考,最佳的工作濃度、孵育時(shí)間和溫度需根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行調(diào)整。在加入HPF工作液之前按需處理細(xì)胞。 1) 根據(jù)具體用量,將DMF儲(chǔ)存液用HHBS緩沖液或其他生理緩沖液稀釋成1-10μM工作液。 2) 根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)處理細(xì)胞(比如,RASM細(xì)胞用50-100nM 血管緊張素II處理3-5h)。 3) 取步驟1)準(zhǔn)備的1-10μM工作液加入細(xì)胞,37oC孵育20-60min。 4) 吸掉染色工作液,用HHBS或其他生理緩沖液替換。 5) 用合適的熒光儀器(Ex/Em=492/515nm)來(lái)檢測(cè)。 【注1】:BSA和酚紅會(huì)影響熒光,需謹(jǐn)慎使用。 【注2】:HPF和APF能用于溶液體系或胞內(nèi)ROS檢測(cè)。 注意事項(xiàng) 1) APF和HPF僅用于科研研究,不可用于體外診斷研究。 2) APF和HPF產(chǎn)生的熒光相對(duì)于其他活性氧探針比如DCFH弱很多,這是探針本身的特性決定的(見(jiàn)附表1 活性氧探針(HPF, APF, DCFH)對(duì)各種活性氧物質(zhì)的反應(yīng)特異性)。 3) 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
北京中生瑞泰/中成謹(jǐn)念科技有限公司是一家專注于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域的高科技企業(yè),專業(yè)提供生物學(xué)試劑、免疫學(xué)試劑、生物化學(xué)試劑、實(shí)驗(yàn)耗材、玻璃器皿以及其他常用實(shí)驗(yàn)室用品以及分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生命科學(xué)基礎(chǔ)研究諸多領(lǐng)域的生物技術(shù)服務(wù)。我們秉承著“質(zhì)量,客戶至上”的原則,用熱情、認(rèn)真、主動(dòng)、周到的服務(wù)實(shí)踐著公司的承諾,進(jìn)而使公司逐步成長(zhǎng)為國(guó)內(nèi)具有影響力的生物產(chǎn)品供貨商。目前公司客戶遍及各大醫(yī)院、科研機(jī)構(gòu)、大專院校、制藥單位、醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)單位、衛(wèi)生防疫、生物技術(shù)公司、食品單位等諸多領(lǐng)域。于此同時(shí)公司嚴(yán)格的管理制度,使中生瑞泰形成了獨(dú)特的市場(chǎng)優(yōu)勢(shì):產(chǎn)品種類齊全、包裝規(guī)格完善、價(jià)格合理、質(zhì)量保證、信息反饋及時(shí)、售后服務(wù)周到。
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